بررسی جلوگیری از توقف سنتز پروتئین و مرگ سلول میزبان بوسیله یک ژن هرپس سیمپلکس ویروس نوع یک بنام ICP34.5 در یک کشت سلولی با منشاء عصبی بنام SK-N-SH

زمینه و هدف: پا سخ سلولی به عفونت‌ ویروسی بک واکنش پیچیده‌ای است که شامل القاء اینترفرون می باشد. اینترفرون‌ها اجزاء مهم و کلیدی پاسخ‌های ایمنی طبیعی میزبان به عفونت ویروسی بوده و از طریق چندین مکانیزم تکتیر ویروس در سلول و در نتیجه ویرولانس آن را مهار می کند. در سلول های آلوده با ویروسهای مختلف، RNA دو رشته‌ای سنتز می‌شود که القاء کننده اینترفرون است. آ‌نزیم پروتئین کیناز R (‍ (PKRبوسیله اینترفرون القاء شده و یک وا‌سطه مهم و عمده پاسخ سلولی به عفونت ویروسی است. فعالیت این آنزیم منجر به فسفوریله ‌شدن جزء آلفا فاکتور آغاز گر (eIF2-a) و در نتیجه توقف سنتز پروتئین در سلول می‌گردد. در سلول آ‌لوده با هرپس سیمپلکس ویروس نوع یک (HSV-1)، نیز این عمل منجر به توقف زودرس سنتز پروتئین سلول میزبان می شود ولیکن این ویروس دارای ژ‌نی بنام ICP34.5 است که مانع این عمل در سلول آلوده با این ویروس می گردد. این ژن عامل تکثیر و ویرولانسHSV-1 در سیستم عصبی مرکزی (CNS) نیز بوده ولیکن برای تکثیر ویروس در تعدادی از کشت های سلولی ضروری نیست، نقش این ژن در کشت سلولی با منشاء عصبی بنام SK-N-SH آلوده با موتانت های نو‌تر‌کیبی ازHSV-1 که اختصا‌صاً ژن مذکور را بیا‌ن کند، بررسی نشده است. لذا هدف از این تحقیق، بررسی این نقش بوده است. روش مطالعه: بر ا‌ساس خاصیت نوترکیبی ژنتیکی، یک موتانت نو ترکیب از ویروس فوق الذکر سا خته شد، درستی اسیدنوکئیک آن با روش ساترن بلاتینگ تایید و سپس با روشهای وسترن بلاتینگ و جلوگیری از توقف سنتز پروتئین، خصوصیات آن بررسی گردید. نتایج: جلوگیری از توقف سنتز پروتئین بوسیله موتا‌‌نت نو‌تر‌کیب مذکور در مقایسه با یک موتانت حذ‌فی فا‌‌قد این ژن و نیز یک سویه وحشی از HSV-1 بنام (17+) در کشت سلولی SK-N-SH نشان داد که ژن مذکور برای حفظ سنتز پروتئین و در نتیجه تکثیر HSV-1 در این کشت سلولی ضروری می با شد. نتیجه گیری: احتمالاً این ژن مسئول جلوگیری از توقف سنتز پروتئین در سلول های فوق الذکر پس از عفونت با HSV-1 می با شد.